凯氏定氮

蛋白质是含氮的有机化合物。

将食物与硫酸和催化剂一起加热和消化以分解蛋白质，分解的氨与硫酸结合形成硫酸铵。

碱化蒸馏然后释放氨，用硼酸吸收氨，然后用硫酸或盐酸的标准溶液滴定，并将转化因子乘以酸消耗，即蛋白质含量。

1.有机物中的胺在强热和CuSO4的作用下，浓硫酸，硝化形成（NH4）2SO4反应式为：2NH2 + H2SO4 + 2H =（NH4）2SO4（其中CuSO4用作催化剂） ）2。

在Kjeldahl在氮气装置中，它与碱反应并通过蒸馏释放NH3。

将反应配方收集在H3BO3溶液中：（NH4）2SO4 + 2NaOH = 2NH3 + 2H2O + Na2SO4 2NH3 + 4H3BO3 =（NH4）2B4O7 + 5H2O 3.使用已知浓度的H2SO4（或HCl）标准溶液滴定，计算氮含量对于HCI消耗量，然后乘以相应的转换因子，得到的蛋白质含量反应式为：（NH4）2B4O7 + H2SO4 + 5H2O =（NH4）2SO4 + 4H3BO3（NH4）2B4O7 + 2HCl + 5H2O = 2NH4Cl + 4H3BO3 Kjeldahl方法用于测定谷物，食品，饲料，水，土壤，污泥，沉积物和化学品中氨，蛋白质氮和苯酚的方法，采用凯氏定氮法，挥发性脂肪酸，氰化物，二氧化硫，乙醇等含量。

它具有非常好的性价比，只有滴定过程需要手动操作，非常适合实验室和检验机构的常规检测。

广泛用于分析食物，农作物，种子，土壤，肥料等样品中的氮或蛋白质含量。

Kjeldahl适用于粮油测试，饲料分析，植物营养测试，土壤和脂肪测试，环境保护，医药，化学工业等的分析，教学和研究。

它主要用于检测食品，食品，乳制品，饮料，饲料，土壤。

水，药物，沉积物和化学品中氨氮和蛋白氮的含量是操作人员的理想工具。

同时，它还可以使用氮气分析仪测量二氧化硫和其他物质。

它是实验室中重要的物理和化学分析仪器。

消化根据样品量选择4个合适的凯氏（Kjeldahl）烧瓶（此处以50 ml为例），其中2个为对照。

将精确称量的样品加入烧瓶中。

务必将样品添加到烧瓶底部。

不要将它粘在瓶颈和瓶颈上。

另外两个用作空白对照以校正样品。

向每个烧瓶中加入约300mg硫酸钾 - 硫酸铜混合物（硫酸钾：五水合硫酸铜= 3：1,6：1或10：1），并向烧瓶中加入3ml浓硫酸。

将上述4个Kjeldahl烧瓶放在通风良好的地方（最好放在通风橱中）进行热消化。

用小火加热煮沸。

此时将产生大量泡沫。

应特别注意不要让黑色物质上升到烧瓶颈部，否则分析结果将受到严重影响。

当混合物停止鼓泡并且蒸汽和二氧化硫也均匀释放时，调节火焰以使液体在瓶中稍微沸腾。

如果在瓶颈上发现黑色颗粒，请小心摇动烧瓶并用消化液冲洗。

在消化过程中经常旋转烧瓶，使所有样品浸入消化液中。

当消化液澄清而呈淡蓝色时，消化结束。

时间通常是5~6小时！如果样品含有更多的赖氨酸或组氨酸，消化时间需要延长1至2倍。

因为这两种氨基酸中的氮不易在短时间内被消化。

蒸馏使用改进的凯氏定氮仪器。

1.洗涤和蒸馏仪器：使用硼酸指示剂（取100毫升2％硼酸溶液，加入约1毫升混合指示剂，摇匀后再出现紫红色;混合指示剂：50毫升0.1％甲基蓝乙醇将+ 200ml的0.1％甲基红乙醇储存在棕色瓶中以检查清洁度。

清洁标准：指示灯不会改变颜色。

2.样品和空白的蒸馏：将2ml稀释的消化液加入加料口，加入反应室，关闭样品口，取一个含有硼酸指示剂的三角瓶到冷凝管的下端。

取约30毫升30％氢氧化钠（W / W）溶液，从样品口缓慢加入，不加时关闭，加入约3毫升蒸馏水，然后继续慢慢加一半然后关闭，让其余水作为液封。

将加热器放回蒸汽发生器下面进行加热（注意：清洁仪器后取下加热器），等待烧瓶中的液体从紫色变为亮绿色，蒸馏5分钟，然后将三角瓶移至使液面离冷凝喷嘴约1cm，用少量蒸馏水洗涤冷凝喷嘴的外周，继续蒸馏1分钟。

同样的空白。

3.清洁仪器：与上述相同，无需使用指示器。

滴定用0.0100mol / L标准盐酸滴定烧瓶中收集的氨（待校准，耗时），直至硼酸指示剂从绿色变为紫色。